La faktoroj kiuj determinas la DNA-sintezefikecon

En la tipa DNA, RNA kaj la sintezo de ne-naturaj nukleaj acidoj, la Deprotection kaj Coupling paŝo ludas decidajn rolojn.

La Deprotection-paŝo devas forigi la DMT-grupon sur la solida subteno aŭ la 5' hidroksilgrupon sur la antaŭa nukleozido kun organika acido, kaj eksponis la hidroksilgrupon por la sekva kunliga paŝo.La 3% trikloroaceta acido en diklorometano aŭ tolueno estas plejparte uzita por efektivigi la malprotektan paŝon.La koncentriĝo de trikloroaceta acido kaj la malprotekta tempo (malbloka tempo) regas la purecon de la finaj produktoj.Malalta koncentriĝo kaj nesufiĉa malbloka tempo lasas nereagitan DMT-grupon, kiuj malpliigas la rendimenton kaj pliigas la nedeziratajn malpuraĵojn.La longa tempo de malblokado povas konduki la depurinon de sintezitaj sekvencoj, formante la neatenditajn malpuraĵojn.

La Coupling paŝo estas sentema al la akvoenhavo de solviloj kaj la humideco en la aero.La koncentriĝo de akvo en la sintezo devus esti malpli ol 40 ppm, pli bone malpli ol 25 ppm.Por konservi la anhidran sintezan kondiĉon, la sintezo de la nukleaj acidoj devas esti farita en malalta humideca medio, do ni rekomendas al nia kliento uzi laAmidites Dissolved Equipment, kiu povas solvi la pulvoran aŭ olean Fosforamiditon en anhidra acetonitrilo por eviti kontakton kun aero.

La faktoroj kiuj determinas la DNA-sintezo-efikecon5
La faktoroj kiuj determinas la DNA-sintezefikecon4

Ĉar la solvado de fosforamiditoj estas pli bone ĉe la ne-akva situacio, kaj molekulaj kaptiloj adsorbi la spurakvon en la reakciiloj kaj amidito, necesas prepari laMolekulaj Kaptiloj.Ni rekomendas 2 g subkribrilon por 50-250ml reakciaĵboteloj, 5g por 250-500ml reakciaĵboteloj, 10g por 500-1000ml reakciaĵboteloj, kaj 20g por 1000-2000ml reagentboteloj.

La solvado de fosforamiditoj devas esti efektivigita sub la inerta atmosfero, kaj la anstataŭigo de aktivigaj reakciiloj kaj acetonitrilo devus esti finita ĝustatempe.La reakciiloj de Kapado kaj Oksidado devas esti uzataj kiel eble plej baldaŭ, la malfermitaj reakciiloj donas malpli da bretdaŭro, kaj malpli da aktiveco dum sintezo.


Afiŝtempo: Aŭg-09-2022