La baza principo de DNA-sintezo

La kemia DNA-sintezo estas bazita sur la solid-faza sintezstrategio kaj fosforamiditkemio.Malsama al la biologia DNA-sintezo, la materialo en kemia DNA-sintezo estas DMT (4, 4-dimethoxytrityl) kaj fosforamidita modifita deoxiriboxyside, kiel montrite en Figuro 1. La DNA-sintezo estas efektivigita sur la solida subteno (ni povas proponi diversajn el la sintezo de DNA).Oligo Sinteza Kolumno), do CPG (kontrolita pora vitro) kaj PS (polistireno), kaj la tuta sintezo estas farita surDNA/RNA-sintezilo, kiu estas nia ĉefa ekipaĵo, havas malsaman modelon kiel: HY Unukanala Sintezilo, HY-12, HY-192 kaj ktp, la sinteza direkto estas de 3' ĝis 5', kaj nukleotido estas enkondukita al la solida subteno per unu sinteza ciklo.Tipe sinteza ciklo enhavas kvar ŝtupojn, Malprotekton, Kunliĝon, Kaptigon kaj Oksigenadon (Figuro 2).La Malprotekto estas metita forigi la DMT-grupon sur la solida subteno aŭ la 5' hidroksilgrupon sur la antaŭa nukleozido, la 3% trikloroaceta acido en diklorometano estas utiligita kiel la malprotekta reakciilo.Tiam la fosforamidita modifita deoxyriboxyside estis permesita al ekspozicio hidroxyl grupo kun la asistado de aktivigilo, te 5-ethylthiotetrazole aŭ 4, 5-dicyanoimidazole, formante la fosfitetriester (III), kaj realigis la Coupling paŝo.Lima paŝo estas aranĝita por bloki la nereagitan hidroksilgrupon dum kunliga paŝo, por minimumigi la formadon de nedezirataj difektsekvencoj.Finfine, la malstabila fosfittriester (III) estas oksigenita al kemia stabila fosfortriester (V) kun jodo kiel oksidant en la nuntempo de piridino.

La sintezita DNA povus esti fendita de la solida subteno per aminolizo, la 2-cianoetil-protektita grupo sur la fosfortriestero kaj la amido sur la nukleobazo estas fendita samtempe, la Sintezaj Platoj kaj Sintezaj Kolumnoj en rakoj estas metitaj rekte en la reagĉambron. de laMalprotekta Ekipaĵo.Kruda DNA povus esti preparita per HPLC, elektroforezo kaj OPC laŭ postulo, ni ankaŭ povas provizi al vi laPuriga Ekipaĵopor Post-traktado.